1954年10月25日生於美國華盛頓。
現任國立台北藝術大學戲劇學院教授、表演工作坊藝術總監。被全球媒體譽為「亞洲劇場導演之翹楚」,曾兩度榮獲台灣「國家文藝獎」。幼時隨父親賴家球先生從事外交工作旅居美國,直到1966年才返台定居台北市。
1969年就讀建國中學,1972年考取輔仁大學英文系,並於1976年畢業。
1978年與丁乃竺結婚,婚後二人一起赴美,賴聲川在加州柏克萊大學唸戲劇藝術研究所,丁乃竺則就讀同校哲學研究所。
1982年荷蘭阿姆斯特丹工作劇團導演雪雲.史卓克,受邀至柏克萊大學客座導戲,賴聲川擔任其副導演,養成日後為人稱道的集體即興創作方法。
1983年取得加州柏克萊大學博士學位,返台任教於新成立之國立藝術學院。
1984年創立劇團表演工作坊,開始不斷創造各種紀錄及實驗,陸續開創台灣舞台劇市場、即興時事電視劇市場。
1985年編導舞台劇那一夜,我們說相聲,三月一日首演於台北市國立藝術館,由表演工作坊演出。該劇大受好評轟動全台,同年4月發行原聲帶,一時成為全台灣有聲出版品銷售之冠。
1986年編導舞台劇暗戀桃花源,獨特的內容再度造成轟動。於1991年、1999年、2006年三度重演,並且於1992年改編為電影。
1995年超級電視台開播,表演工作坊於9點半的時段開闢即興時事電視劇我們一家都是人,將劇場表演帶入電視,頗受好評,1996年初移到8點檔時段。直到1997年,賴聲川參與編導共244集。
作品:我們都是這樣長大的、摘星、過客、那一夜,我們說相聲、變奏巴哈、暗戀桃花源、田園生活、圓環物語、西遊記、回頭是彼岸、這一夜,誰來說相聲?、臺灣怪譚、紅色的天空、又一夜,他們說相聲、先生,開個門!、我和我和他和他、十三角關係、菩薩之三十七種修行之李爾王、如夢之夢、在那遙遠星球、一粒沙、我們一家都是人、我們兩家都是人、暗戀桃花源、飛俠阿達。
書籍:《那一夜》,《我們說相聲》、《暗戀桃花源》、《圓環物語》、《今之昔》、《西遊記》、《回頭是彼岸》、《賴聲川:劇場》、《僧侶與哲學家》、《賴聲川的創意學》。