1954年10月25日生於美國華盛頓。

現任國立台北藝術大學戲劇學院教授、表演工作坊藝術總監。被全球媒體譽為「亞洲劇場導演之翹楚」，曾兩度榮獲台灣「國家文藝獎」。幼時隨父親賴家球先生從事外交工作旅居美國，直到1966年才返台定居台北市。

1969年就讀建國中學，1972年考取輔仁大學英文系，並於1976年畢業。

1978年與丁乃竺結婚，婚後二人一起赴美，賴聲川在加州柏克萊大學唸戲劇藝術研究所，丁乃竺則就讀同校哲學研究所。

1982年荷蘭阿姆斯特丹工作劇團導演雪雲．史卓克，受邀至柏克萊大學客座導戲，賴聲川擔任其副導演，養成日後為人稱道的集體即興創作方法。

1983年取得加州柏克萊大學博士學位，返台任教於新成立之國立藝術學院。

1984年創立劇團表演工作坊，開始不斷創造各種紀錄及實驗，陸續開創台灣舞台劇市場、即興時事電視劇市場。

1985年編導舞台劇那一夜，我們說相聲，三月一日首演於台北市國立藝術館，由表演工作坊演出。該劇大受好評轟動全台，同年4月發行原聲帶，一時成為全台灣有聲出版品銷售之冠。

1986年編導舞台劇暗戀桃花源，獨特的內容再度造成轟動。於1991年、1999年、2006年三度重演，並且於1992年改編為電影。

1995年超級電視台開播，表演工作坊於9點半的時段開闢即興時事電視劇我們一家都是人，將劇場表演帶入電視，頗受好評，1996年初移到8點檔時段。直到1997年，賴聲川參與編導共244集。

作品：我們都是這樣長大的、摘星、過客、那一夜，我們說相聲、變奏巴哈、暗戀桃花源、田園生活、圓環物語、西遊記、回頭是彼岸、這一夜，誰來說相聲？、臺灣怪譚、紅色的天空、又一夜，他們說相聲、先生，開個門！、我和我和他和他、十三角關係、菩薩之三十七種修行之李爾王、如夢之夢、在那遙遠星球、一粒沙、我們一家都是人、我們兩家都是人、暗戀桃花源、飛俠阿達。

書籍：《那一夜》，《我們說相聲》、《暗戀桃花源》、《圓環物語》、《今之昔》、《西遊記》、《回頭是彼岸》、《賴聲川：劇場》、《僧侶與哲學家》、《賴聲川的創意學》。